Principy imunoanalytických metod

autor: Jindra Vrzalová

Multiplexové měření – tedy měření více analytů zároveň - je logickým řešením pro popis komplexním fyziologických a patofyziologických dějů, kde nezáleží pouze na absolutní koncentraci jednotlivých členů, ale na poměrech agonistů a antagonistů, faktorů a jejich inhibitorů. Příkladem velmi komplexních regulací jsou cytokiny a růstové faktory. Cílem multiplexových analýz je

• popis zastoupení jednotlivých proteinů (deskriptivní proteomika),
• studium vzájemných vztahů proteinů,
• vyhledávání a validace biomarkerů,
• vyhledávání cílů terapie a
• klinická diagnostika.

Přínosem multiplexového typu měření je

• finanční efektivita,
• redukce potřebného času a práce pro analýzy,
• snížení objemu vzorku a
• validita dat při porovnávání poměrů hladin jednotlivých proteinů.

Multiplexové analytické technologie v oblasti proteinů jsou založeny na třech principech:

• imunoanalýza,
• separační technologie (chromatografie nebo 2D elektroforéza) a
• hmotnostní spektrometrie

nebo na jejich kombinacích.

V následujícím textu se budeme zabývat pouze multiplexovými přístupy založenými na imunoanalytických postupech. Představené technologie mají sloužit jako přehled principů, zvláštní pozornost je věnována technologii xMAP. Konkrétní chemikálie, reagencie a přístroje jsou dosažitelné od mnoha výrobců, jejich spektrum se stále vyvíjí a nejsou zde proto uváděny. Multiplexové měření je dnes nedílnou součástí mnoha výzkumů a v některých oblastech se začíná uplatňovat i v klinické rutinní praxi.

Obrázek 22. Srovnání několika typů multiplexových metod.