Články a aktuality 2012 - 2018

Sledováním retikulovaných trombocytů můžeme odlišovat poruchy megakaryopoézy od trombocytopenií ze zvýšené destrukce, konzumpce nebo ztráty krevních destiček nebo sekundárních, imunitě podmíněných trombocytopenií. Lze také monitorovat efekt terapie u trombocytopenií, po transplantacích kmenových buněk nebo po chemo/radioterapii.

Vyšetřování retikulovaných trombocytů se nyní, prostřednictvím nových technologií, může běžně provádět i na některých hematologických analyzátorech krevních obrazů. Vyšetření lze provádět i na průtokovém cytometru, ale analýza je časově i cenově náročnější. Stanovení na hematologických analyzátorech je ve srovnání s průtokovým cytometrem vhodnější, poněvadž se odvíjí od velmi přesného měření absolutního počtu trombocytů a výsledky jsou dobře reprodukovatelné.

Důvodem ke sledování a porovnání výsledků vyšetření retikulovaných trombocytů bylo vybavení naší laboratoře rutinní morfologie na Oddělení klinické hematologie FN Brno dvěma hematologickými analyzátory s rozdílnými principy měření. V rámci standardizace práce v laboratořích je dnes již samozřejmé, že vydávané výsledky musí být správné, přesné a porovnatelné. K tomu nám slouží řada kontrolních procesů spolu s referenčními metodami a materiály. V tomto ohledu však vyšetření retikulovaných trombocytů má jistá omezení, kvůli kterým tento parametr má prozatím spíše laboratorní využití s limitovaným diagnostickým algoritmem. Pro vyšetřování retikulovaných trombocytů také neexistují referenční metody, ani kontrolní materiály a nejsou ani standardní referenční rozmezí.

Porovnání získaných numerických hodnot retikulovaných trombocytů bylo prováděno graficky (viz Graf 1,2) mezi výsledky z hematologického analyzátoru Abbott Cell-Dyn Sapphire a Sysmex XE-5000. Vzhledem k tomu, že hodnota pro podíl retikulovaných trombocytů vychází z celkového počtu trombocytů (PLT), bylo vhodné porovnat i počet trombocytů, poněvadž každý přístroj vydává počet PLT ze zcela odlišného způsobu analýzy. Analyzátor Abbott vydává výsledky PLT z optické analýzy a analyzátor Sysmex z impedanční analýzy. Porovnání bylo provedeno na 34 vzorcích s nízkým počtem PLT (L-PLT) a pro kontrolu bylo zvoleno 9 vzorků s normálním počtem PLT (N-PLT). U všech vzorků byla mikroskopicky hodnocena morfologie PLT z pohledu granulace a hypogranulace PLT formou procentuálního vyjádření hypogranulárních trombocytů (mikroPLT), viz Obrázek 1.

Obrázek1: Hypogranulovaný trombocyt

Minima, maxima a mediány z vlastních měření a z mikroskopického hodnocení jsou uvedeny v Tabulce 1.

Tabulka 1: Souhrn výsledků z analyzátorů CD Sapphire/XE-5000 a z mikroskopického hodnocení

Výsledky mikroskopického hodnocení byly graficky znázorněny a dány do souvislosti s výsledky z analyzátorů (viz Graf 1,2). Porovnání jednotlivých získaných hodnot retikulovaných trombocytů z obou analyzátorů s podílem hypogranulárních trombocytů pro normální počty trombocytů je uvedeno v Grafu 1.

Graf 1: Hodnoty retikulovyných PLT a podíly hypogranulárních PLT pro N-PLT

Porovnání jednotlivých naměřených hodnot retikulovaných trombocytů z obou analyzátorů s podílem hypogranulárních trombocytů pro nízké počty trombocytů je uvedeno v Grafu 2.

Graf 2: Hodnoty retikulovyných PLT a podíly hypogranulárních PLT pro L-PLT

Pro retikulované PLT uvádí firma Abbott referenční hodnoty < 4,5% a firma Sysmex < 6,1%.

U obou sledovaných souborů (pro N-PLT i L-PLT) jsou počty PLT z analyzátorů jasně srovnatelné. Minima, maxima i mediány získaných hodnot pro retikulované PLT jsou také srovnatelné. Z výsledků je zřejmé, že pro normální počty PLT jsou naměřené hodnoty retikulovaných trombocytů (reticPLT) ve firmách uváděných referenčních mezích a přítomnost hypogranulárních PLT je velmi nízká. Pro vzorky s nízkým počtem PLT jsou naměřené hodnoty retikulovaných trombocytů z obou analyzátorů vyšší a maximální hodnoty z celého souboru jsou srovnatelné, ale při porovnání výsledků pro jednotlivé pacienty byly zjištěny významné rozdíly. Z tohoto důvodu je vhodnější sledovat trend výsledků ze stejného typu analyzátoru. Při hodnocení morfologie PLT byl u vzorků s nízkým počtem PLT a vysokým podílem reticPLT nalezen vyšší podíl hypogranulárních PLT.

Z výsledků je patrné, že morfologické hodnocení PLT má i v tomto ohledu stále svůj význam, poněvadž pokud laboratoř nemá možnost vyšetřovat retikulované PLT, tak může v této souvislosti přítomnost hypogarnulárních trombocytů částečně odrážet i vysoký podíl retikulovaných PLT.